شماره کاتالوگ
FG-520.25
FG-520.50
FG-520.100
حیطه کاربرد کیت تشخیص آنیوپلوئیدی
محصول TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit جهت شناسایی آنیوپلوئیدی کروموزومهای 13(سندروم پاتو)، 18 (سندروم ادوارد)، 21 (سندروم داون)، X (سندرومهای ترنر، کلاین فلتر و XXX) و Y (سندروم ژاکوبز) در جنین بر اساس روش مولکولی Quantitative Fluorescent-Polymerase Chain Reaction (QF-PCR) با بررسی 27 مارکر ژنی و با استفاده از DNA تخلیص شده از مایع آمنیوتیک (Amniotic fluid) و پرزهای کوریونی جفت (Chorionic Villus Sampling) کاربرد دارد.
اساس عملکرد محصول
اساس عملکرد TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit، واکنش فلورسانت کمی زنجیره ای پلیمراز Quantitative Fluorescent PCR (QF-PCR) می باشد که در شناسایی تریزومی های غیر موزائیک حائز اهمیت می باشد. این محصول با استفاده از پرایمرهای نشان دار شده با رنگ فلورسنت، به تکثیر 27 ناحیه از ژنوم شامل توالی های تکراری کوتاه (Short Tandem Repeat) و تعدادی از مارکرهای غیر پلی مورفیک می پردازد.
محصولات PCR بدست آمده با استفاده از دستگاه Genetic Analyzer با تکنیک Capillary electrophoresis تفکیک شده و سپس با نرم افزارهای اختصاصی آنالیز می شوند. اندازه نسبی هر آلل با محاسبه ارتفاع و یا سطح زیر پیک ها تعیین می گردد. در صورتی که آلل های مربوط به مارکری خاص هتروزیگوت باشند، در افراد نرمال که از هر کروموزوم اتوزوم دو نسخه وجود دارد، به ازای مارکرهای اتوزومال، دو سیگنال با سطح زیر منحنی مساوی ایجاد می گردد.
در صورتی که فرد به تریزومی مبتلا باشد، سه نسخه از کروموزوم مربوطه وجود دارد و نسبت های 2:1، 1:2 و یا سه سیگنال 1:1:1 ایجاد می نماید. در مورد مارکرهای هموزیگوت فقط یک سیکنال مشاهده می گردد که در این صورت به چنین مارکرهایی غیر اطلاع رسان (Uninformative) گفته می شود. چنین مارکرهایی نمی توانند در شناسایی اختلالات تعدادی کروموزوم مفید باشند. این کیت در سه مرحله اصلی جهت استفاده صحه گذاری شده است که عبارتند از:
مرحله اول: استخراج DNA
محصول TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit با DNA الگوی حاصل از کیت های استخراج DNA مانند کیت QIAamp DNA Blood Mini Kit محصول شرکت Qiagen برای نمونه های مایع آمنیوتیک و پرزهای کوریونی CVS بهینه سازی شده است.
مرحله دوم: تکثیر DNA
این مرحله در محصول TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit با دستگاه ترموسایکر Applied Biosystem (Veriti) و BioRad (T 100) بهینه سازی شده است.
مرحله سوم: الکتروفورز و آنالیز نتایج
محصول PCR حاصل از این کیت با دستگاه Genetic Analyzer مدل های ABI 3100، ABI 3739، ABI 3130 (XL) و ABI 3500 (XL) که قادرند 5 رنگ را شناسایی کنند قابل آنالیز می باشد. جهت آنالیز نتایج دستگاه از نرم افزارهای®GeneMapper و یا ®GeneMarker استفاده می شود.
محتویات کیت TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit
محصول TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit با مدل های 25، 50 و 100 تستی قابل ارائه است. جدول زیر نشان دهنده اجزای تشکیل دهنده کیت می باشد:
| The composition of TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit | ||||
| Tube/Cap Color | Vol. for 100 rxn (μl) | Vol. for 50 rxn (μl) | Vol. for 25 rxn (μl) | Kit Content |
| Amber/Yellow | 55 × 4 | 55 × 2 | 55 | TS-1 |
| Clear/Red | 375 × 4 | 375 × 2 | 375 | TS-2 |
| Clear/Blue | 70 × 4 | 70 × 2 | 70 | TS-3 |
| .The kit contains a user’s Manual inside the package* | ||||
مهم ترین ویژگی های TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit
- تشخیص پیش از تولد آنیوپلوئیدی کروموزومهای 13، 18، 21، X و Y با بررسی 27 مارکر ژنتیکی شامل STR، SD و SRY
- بر اساس واکنش QF-PCR و تکنیک Capillary electrophoresis
- نمونههای DNA تخلیص شده از مایع آمنیوتیک و پرزهای کوریونی جفتی جنین (CVS)
- اختصاصیت و حساسیت عملکردی %100
- شناسایی آنیوپلوئیدی در کمتر از 5 ساعت پس از نمونه گیری
- آنالیز و تفسیر نتایج با نرم افزارهای اختصاصی GeneMapper® یا GeneMarker®
- دارای گواهینامه سیستم مدیریت کیفیت تجهیزات پزشکی ISO 13485:2016و ISO 9001:2015
ویژگی های فنی
| Technical specification of TritaFetusGene®Multiplex QF-PCR Diagnostic Kit | |
| Kit Specifications and characteristics | Parameters |
| Multiplex PCR | Methodology |
| Quantitative Fluorescent PCR (QF-PCR) | Technique |
| Semi-quantitative | Type of Analysis |
| Short Tandem Repeats (STR); Segmental Duplications (SD); SRY gene | Target Sequence |
| DNA extracted from amniotic fluid (AF) and chorionic villus sampling (CVS) | Validated Specimen |
| More than %99 | Specificity |
| More than %99 | Sensitivity |
| 20±5°C– | Storage |
| 6–FAMTM,VIC®, NEDTM, PET® | Dye |
| 30-40 ng/rxn | Recommended DNA Concentration |
| RIBO-prep nucleic acid extraction kit (AmpliSens®, Russia) QIAamp® DSP DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Germany) |
Validated Extraction Methods |
| BioRad (T 100), Applied Biosystem (Veriti), GeneAmp PCR System 9700 (Ramping rates: heating 0.8 ̊C/s, cooling 1.6 ̊C/s) |
Validated thermocyclers |
| Capillary electrophoresis | Detection Method |
| Applied Biosystems™ 3130/3130 xL Genetic Analyzer Applied Biosystems™ 3500/3500 xL Genetic Analyzer ABI 3100 Genetic Analyzer or ABI 3730 Genetic Analyzer |
Validated Genetic analyzers |
| 560 SIZER ORANGE (Devyser-Sweden) GeneScan™ 500 LIZ® Size Standard (Life Technologies-USA) GeneScan™ 600 LIZ® Size Standard (Life Technologies-USA) |
Size standard |
| GeneMarker®; GeneMapper® | Validated Softwares |
