شماره کاتالوگ
CH-1624.25
CH-1624.50
CH-1624.100
حیطه کاربرد
کیت Trita® Chimerism Analysis Kit جهت تعیین میزان موفقیت پیوند سلول های بنیادی خون و مغز استخوان و بررسی حضور سلول های فرد دهنده در بدن فرد گیرنده (Chimerism) طراحی و تولید شده است. اساس عملکرد محصول، روش مولکولی Multiplex fluorescent PCR است که به بررسی همزمان 16 مارکر آللی در ژنوم (DNA) استخراج شده از خون و یا مغز استخوان افراد بالغ یا نوزاد گیرنده پیوند میپردازد.
اساس عملکرد محصول
محصول Trita® Chimerism Analysis Kit به منظور بررسی و آنالیز کایمریسم در افراد گیرنده پیوند طراحی و تولید شده است و قادر است مقادیر اندک جمعیت سلولی فرد گیرنده را شناسایی نماید. این محصول به گونه ای طراحی شده است که می تواند 16 مارکر آللی شامل 15 مارکر Short Tandem Repeat (STR) با هتروزیگوسیتی بالا و یک مارکر تعیین جنسیت (Amelogenin) را به صورت همزمان در یک واکنش Multiplex Fluorescent PCR شناسایی و تکثیر کند. پرایمرهای مورد استفاده در این کیت با رنگهای فلورسنت F6-FAMTM، VIC®، NEDTM و ®PET نشان دار شده است. مراحل استفاده از این محصول شامل استخراج DNA از نمونه (خون و یا مغز استخوان افراد گیرنده پیوند)، تکثیر مارکرهای ژنی با روش PCR Multiplex Fluorescent، شناسایی با روش کپیلاری الکتروفورز با استفاده از دستگاه ژنتیک آنالایزر (با قابلیت شناسایی 5 رنگ) و آنالیز نتایج با استفاده از نرمافزار ®GeneMarker میباشد. استفاده از مارکرهای آللی پلیمورف STR که روی 13 کروموزوم اتوزوم دارای پراکنش آللی هستند، در تعیین تمایز آللی فرد دهنده و فرد گیرنده پیوند حائز اهمیت است و صحت و سرعت آنالیز کایمریسم را افزایش میدهد. علاوه بر این، عدم وجود پلیمورفیسم در محل اتصال پرایمرها، انتخاب مارکرهایی با هتروزیگوسیتی بالا و دارای سایز آللی مناسب، از جمله مهم ترین ویژگی های این کیت می باشد.
جدول زیر، کلیهی مارکرهای مورد بررسی در Trita® Chimerism Analysis Kit را به همراه ناحیه استقرار کروموزومی و رنگ های فلورسنت متصل به پرایمرهای کیت نشان میدهد.
| Dye Color | Marker
(Locus) |
No |
| Yellow | D8S1179 | 1 |
| Green | D7S820 | 2 |
| Yellow | CSF1PO | 3 |
| Red | D3S1358 | 4 |
| Red | D13S317 | 5 |
| Blue | D21S11 | 6 |
| Green | D16S539 | 7 |
| Yellow | D5S818 | 8 |
| Blue | D18S51 | 9 |
| Yellow | TPOX | 10 |
| Blue | vWA | 11 |
| Yellow | TH01 | 12 |
| Green | FGA | 13 |
| Blue | SE-33 | 14 |
| Green | D2S1338 | 15 |
| Blue | AMELXY | 16 |
محتویات کیت
کیت Trita® Chimerism Analysis Kit در 3 مدل 25، 50 و 100 تستی قابل ارائه است. جدول زیر نشان دهندهی اجزای کیت و مقادیر هر یک از آنها در سایزهای مختلف این محصول میباشد:
| Composition of Trita® Chimerism Analysis Kit | ||||
| Tube/Cap Color | Vol. for 100 rxn (µl) | Vol. for 50 rxn (µl) | Vol. for 25 rxn (µl) | Kit Contents |
| Amber/Yellow | 4 × 55 | 2 × 55 | 55 | TCH-1 |
| Clear/Red | 4 × 375 | 2 × 375 | 375 | TCH-2 |
| Clear/Green | 4 × 70 | 2 × 70 | 70 | TCH-3 |
|
* The kit contains a quick manual inside the package. |
||||
ویژگی های فنی
در جدول زیر، مهم ترین ویژگی های فنی Trita® Chimerism Analysis Kit به طور خلاصه ارائه شده است:
| Technical specification of Trita® Chimerism Analysis Kit | |
| Kit Specifications and characteristics | Parameters |
| Multiplex Fluorescent PCR
(Containing Internal allelic ladder) |
Technique |
| Qualitative | Type of Analysis |
| Short Tandom Repeats (STR); Amelogenin XY | Target Sequence |
| Human DNA extracted from Blood, Bone marrow | Validated Specimen |
|
-20 ± 5 °C |
Storage |
|
6-FAMTM, VIC®, NEDTM, PET® |
Dye |
| QIAamp® DSP DNA Blood Mini Kit (Cat No. 61104- Qiagen, Germany) | Validated Extraction Method |
| BioRad (T 100), Applied Biosystem (Veriti), GeneAmp PCR System 9700 (Ramping rates: heating 0.8 ̊C/s, cooling 1.6 ̊C/s) |
Validated thermocyclers |
| Capillary electrophoresis | Detection Method |
| Applied Biosystems™ 3130/3130 xL Genetic Analyzer Applied Biosystems™ 3500/3500 xL Genetic Analyzer |
Validated Genetic analyzers |
| 560 SIZER ORANGE (Devyser-Sweden) GeneScan™ 500 LIZ® Size Standard (Life Technologies-USA) GeneScan™ 600 LIZ® Size Standard (Life Technologies-USA) |
Size standard |
|
GeneMarker® |
Validated Softwares |
