شماره کاتالوگ
B27-124.25
B27-124.50
B27-124.100
حیطه کاربرد
محصول Trita®HLA-B27 Genotyping Kit، جهت شناسایی کیفی (Qualitative) تمامی زیر‌شاخه‌های HLA-B27 انسانی در افراد مشکوک یا مبتلا به بیماریهای التهابی مانند اسپوندیلیت آنکیلوزان (AS)، سندروم رایتر (Reactive arthritis)، یووئیت (Uveitis) و بیماری پوستی پسوریازیس (Psoriasis) طراحی و تولید شده است. اساس عملکرد محصول، واکنش مولکولی Taqman® Real-Time PCR با استفاده از DNA ژنومی استخراج شده از خون محیطی (Peripheral Blood) انسان می‌باشد. نتایج حاصل از این کیت مولکولی بایستی به صورت تکمیلی همراه با سایر اطلاعات بالینی و تستهای آزمایشگاهی بیماران تفسیر شود و مورد استناد قرار گیرد.
اساس عملکرد محصول
اساس عملکرد محصول Trita® HLA-B27 Genotyping Kit، تکنیک مولکولی Real-Time PCR TaqMan® است که شناسایی کیفی (Qualitative) تمامی زیر‌شاخه‌های HLA-B27 را در 2 کانال مجزای فلورسنت FAM و HEX مورد شناسایی قرار میدهد. پروبهای TaqMan® در انتهای 5′ دارای مولکول فلورسنت یا فلوئوروفور (Fluorophore) و در انتهای 3′ دارای مولکول خاموش کننده (Quencher) هستند و به دلیل مجاور بودن خاموش کننده با فلوئوروفور، تابش فلورسنت ندارند. حین انجام واکنش Real-Time PCR، پرایمرها و پروبها به صورت اختصاصی به توالی هدف خود متصل میشوند و آنزیم Taq DNA Polymerase با خاصیت 5′→3′ اگزونوکلئازی، پروبها را تجزیه کرده و مولکول فلورسنت و خاموش کننده از پروب جدا میشوند. مولکول فلورسنت آزاد شده باعث ایجاد سیگنال فلورسنت میشود که این سیگنال توسط دستگاه Real-Time PCR قابل شناسایی و ثبت می‌باشد. به منظور اطمینان از کیفیت استخراج DNA و عدم حضور بازدارندههای PCR، ژن بتاگلوبین انسانی (HBB) به عنوان کنترل داخلی در کانال زرد (HEX) در نظر گرفته شده است. روش مولکولی Real-Time PCR TaqMan® به دلیل عدم نیاز به الکتروفورز، روشی سریع، آسان و مقرون به صرفه برای اهداف غربالگری و تشخیص مولکولی است. در جدول زیر ژن‌های مورد بررسی توسط کیت و کانالهای مربوط به آنها نشان داده شده است:
| Target genes of the kit and their probe specifications in Trita® HLA-B27 Genotyping Kit | ||
| Quencher Dye | Reporter Dye | Genes |
| BHQ1 | FAM | HLA-B27 |
| BHQ1 | HEX | Internal Control |
محتویات Trita® MSI Analysis Kit
محصول Trita® HLA-B27 Genotyping Kit در سه مدل 25، 50 و 100 تستی قابل ارائه است. جدول زیر نشان دهندهی اجزای کیت و مقادیر هر یک از آنها در مدلهای مختلف این محصول می‌باشد.
| Composition of Trita® HLA-B27 Genotyping Kit | ||||
| Tube/Cap Color | 100 rxn (µl) | 50 rxn (µl) | 25 rxn (µl) | Kit Contents |
| Amber/ Yellow | 500 | 250 | 125 | HLA-PR |
| Amber/ White | 1000 | 500 | 250 | qPCR Mix |
| Clear/Red | 500 | 250 | 125 | Positive Ctrl. (Ctrl+) |
| Clear/Clear | 500 | 250 | 125 | Negative Ctrl. (Ctrl-) |
|
* The kit contains a Quick Manual inside the package. |
||||
ویژگی های فنی
در جدول زیر، مهم ترین ویژگی های فنی محصول Trita®HLA-B27 Genotyping Kit به طور خلاصه ارائه شده است:
| Technical specification of Trita® HLA-B27 Genotyping Kit | |
| Parameters | Kit Specifications and characteristics |
| Taqman® fluorescent probe based Real-time PCR | Technique |
| Qualitative | Type of Analysis |
| HLA-B27 Gene | Target Sequence |
| Internal Control (IC): Endogenous Internal control (Human HBB Gene)
Positive Control (Ctrl+): Plasmid containing HLA-B27 Gene Negative Control (Ctrl-): DNase/RNase-Free Deionized Water |
Control Reagents |
| human whole blood treated with
EDTA or citrate |
Validated Specimen |
| 5 ul (Equal to about 50-100 ng/rxn) | Validated DNA Conc. |
| Freezer (-20 ± 5 °C) | Storage |
| FAM (Green), Hex (Yellow) | Detection Channels |
| QIAamp DNA Blood Mini Kit (Qiagen, Germany) | Validated
Extraction Methods
|
| LightCycler® 96 System (Roche, Germany)
Magnetic Induction Cycler (MIC) PCR Machine (Biomolecular systems, Australia) |
Validated
Real-time PCR Systems |
| LightCycler® 96 Software
micPCR Software |
Validated Software |
